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ELISA試劑盒實驗前如何做好優化?

提供者:上海古朵生物科技有限公司   發布時間:2019/3/25  閱讀次數:62次   進入該公司展臺

ELISA檢測試劑盒包被條件的優化:
1、包被液的挑選:通常常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,假如包被的抗原在堿性條件下不穩定的話,也可以運用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。

2、包被濃度的挑選:包被的最適濃度隨固相載體和包被物的性質改變,通常蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml,要清晰對于特定包被抗原的最適包被濃度需求通過試驗來斷定。

3、包被溫度的挑選:通常是4-8度條件下放置一個黑夜或者37度保溫2小時,咱們強烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的堅持。

4、包被抗原的挑選:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物,因為分子量太小,通常難于直接吸附在酶標板上,通常都先使其與無關蛋白質,比如BSA等偶聯,偶聯物吸附于固相載體上。

ELISA檢測試劑盒加樣的優化:
在這一進程中,通常狀況下有三次加樣,它們分別是加標本,加酶聯系物,加底物。凍結血清融解后,蛋白質部分濃縮,散布不均,應充沛混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、縮短后即可獲得。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。通常說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超越一星期測定的需低溫冰存。


生物試劑的使用常識:

(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特性)。

(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對不允許用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。

(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。

(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(怕產生原試劑的再次污染)。

關鍵詞:ELISA試劑盒  古朵生物  

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